ELISA試劑盒自從60-70年代問(wèn)世以來(lái)，得到科研工作者的認可及推崇，在歐美及中國獲得很大的推廣，尤其是國內生化領(lǐng)域的長(cháng)足發(fā)展。免疫吸附試驗（也叫ELISA試劑盒實(shí)驗） 因其操作簡(jiǎn)單，靈敏度高，特異性好，經(jīng)濟安全等特點(diǎn)所以在科研界被廣泛應用，又因為其操作步驟復雜，一般包括試劑準備，樣本收集，加樣，溫育，洗滌，顯色，比色，結果判定等，其中任何一項操作不當都會(huì )對檢測結果產(chǎn)生很大影響。所以必須加強ELISA檢測的全面質(zhì)量控制，保證其結果的準確可靠。
Elisa實(shí)驗結果的影響因素包括檢測樣品因素、操作因素等。在實(shí)驗操作的過(guò)程中有一些注意事項。下面為大家分享操作Elisa試劑盒的實(shí)驗需注意哪些事項(供參考)：
1、加樣后及時(shí)放人孵箱，標本較多時(shí)，要分批操作。按說(shuō)明步驟嚴格控制操作時(shí)間，防止孵育時(shí)間人為延長(cháng)，導致非特異性結合緊附于反應孔周?chē)?，難以清洗*。
2、作時(shí)必須戴手套，穿工作衣，嚴格健全和執行消毒隔離制度。
3、剩余樣品及廢棄物應經(jīng)121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘，或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄。
4、同批號試劑組分不得混用。
5、洗滌時(shí)各孔均需加滿(mǎn)液體，防止孔口有游離酶不能洗凈。
6、每次實(shí)驗留一孔作為空白調零孔，該孔不加任何試劑，只是最后加底物溶液及2N H2SO4。測量時(shí)先用此孔調OD值至零。
7、要確保微量加樣器的準確性，可以使用蒸餾水和電子天平進(jìn)行確定(由于蒸餾水不含雜質(zhì)，溫度環(huán)境為20%左右時(shí)，lmL的水可以看作是lg、200 L的水可以看作是0.2g)每一把微量加樣器都應該將其最高量程和zui低量程進(jìn)行確定。
8、在使用微量加樣器時(shí)，吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭，即使吸取標準品溶液。
9、吸取液體時(shí)速度不易太快，以免產(chǎn)生氣泡，吸取的量不夠準確。
10、手工洗板時(shí)每次加入洗滌液后。應靜置15～30s，不要將一個(gè)酶標孑L中的洗滌液濺入另一酶標孔中，防止交叉污染。甩去洗滌液后將酶標板放在毛巾或吸水紙上拍干。
11、底物為T(mén)MB，避免與皮膚相接觸。終止液為2tool的濃硫酸具有腐蝕性，應盡量避免接觸皮膚。
ELISA檢測操作步驟較為復雜，影響測定結果的因素的原因也較多，分布在測定操作的各個(gè)步驟中，因此必須加強各環(huán)節的質(zhì)量控制，才能得到準確可靠的檢測結果。
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