大家來(lái)了解下，細胞凍存的注意事項!

　　大家來(lái)了解下，細胞凍存的注意事項!

　　細胞凍存是利用細胞凍存管，將細胞放在低溫環(huán)境，減少細胞代謝，以便長(cháng)期儲存的一種技術(shù)。細胞凍存是細胞保存的主要方法之一，起到了細胞保種的作用。不妨來(lái)看看BUNSEN本生小編的詳解：

　　細胞凍存與復蘇：

　　一般來(lái)說(shuō)，細胞進(jìn)行轉移，最佳的策略是進(jìn)行低溫保存，而細胞深低溫保存的基本原理是：在-70℃以下時(shí)，細胞內的酶活性均已停止，即代謝處于*停止狀態(tài)，故而可以長(cháng)期保存

　　1、從增殖期到形成致密的單層細胞以前的培養細胞都可以用于凍存，但為對數生長(cháng)期細胞。在凍存前天盡量換培養液;

　　2、將凍存管放入液氮容器或從中取出時(shí)，要做好防護工作，以免凍傷;

　　3、凍存和復蘇盡量用新配制的培養液。

　　細胞凍存：

　　目前細胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護劑，這兩種物質(zhì)能提高細胞膜對水的通透性，加上緩慢冷凍可使細胞內的水分滲出細胞外，減少細胞內冰晶的形成，從而減少由冰晶形成的細胞損傷。

　　1、10%的DMSO+90%胎牛血清。甘油一般用于菌種保存很少用于細胞凍存。

　　2、取對數生長(cháng)期的細胞，用胰蛋白酶把單層生長(cháng)的細胞消化下來(lái)，懸浮生長(cháng)的細胞則直接將細胞移至15ml離心管中。

　　3、離心1000 rpm,5 min.

　　4、去除胰蛋白酶及舊的培養液，加入適量配制好的凍存培養液，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，計數，調節凍存液中細胞的最終密度為5x10^6/ml~1x10^7/ml.

　　5、 在凍存管上標明細胞的名稱(chēng)，凍存時(shí)間及操作者。

　　6、 凍存：標準的凍存程序為降溫速率-1~-2℃/min;當溫度達到-25℃以下時(shí)，可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃時(shí)，則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細胞的凍存管放入-20℃冰箱2h，然后放入-70℃冰箱中過(guò)夜，取出凍存管，移入液氮容器內。

　　大家來(lái)了解下，細胞凍存的注意事項!本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命，追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承：遵紀守法，嚴于律己，寬仁以待，敢于承擔的企業(yè)精神作為標準，以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護和拓展市場(chǎng)，較大限度的滿(mǎn)足客戶(hù)的需求。與客戶(hù)的共贏(yíng)，是我們的發(fā)展目標。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作，共創(chuàng )美好的未來(lái)。