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本生PCR板—96孔板鋪板的小技巧

更新時(shí)間:2023-03-16    點(diǎn)擊次數:1936

  本生PCR板—96孔板鋪板的小技巧


  96孔板進(jìn)行鋪板的?當細胞用96孔板接種時(shí),細胞經(jīng)常是不均勻分布。第二天就會(huì )發(fā)現有些地方出現堆積性生長(cháng),而還有不少地方細胞則很稀疏,細胞密集的地方因細胞與細胞之間的接觸抑制影響細胞的生長(cháng),這樣就很難評價(jià)干預因素對細胞的作用。因此,將96孔板種均勻也是進(jìn)行后續實(shí)驗的將以用的老辦法和用的新方法比較一下,以讓大家看看各自?xún)?yōu)缺。

  1、老方法:植板后,用手拿起96孔板,左右搖動(dòng),然后來(lái)回搖動(dòng)幾次,但這種方法通常在2-3個(gè)細胞的5口井中分布不均勻。  在大多數情況下,中間的孔會(huì )出現成堆的分布,會(huì )讓人感到一陣麻煩。 再一次,看到一位老師將電路板放在振動(dòng)器上并搖動(dòng)幾分鐘。 結果更糟。 細胞都在中間。

  通常,會(huì )在96孔板的每個(gè)孔上,加入100微升的細胞懸浮液。把它從左邊加到洞底。加入一半板材后,與未加入的細胞懸浮液混合,然后繼續加入剩余的一半板材。蓋上蓋子后,用左手輕輕握住木板的左邊,然后用右手輕拍木板的右邊緣。注意力集中在力量上(通常敲擊它三次)。太多或太多次會(huì )導致細胞堆積。順時(shí)針轉動(dòng)盤(pán)子(逆時(shí)針?lè )较虿缓?  ,將剩下的三面逐一拍打,靜置5分鐘左右,然后放入37度的培養箱中。本生熒光定量PCR板

  2、新方法:這種方法是非常好,非常均勻播種。使用等速吸引吸取細胞,然后吸移嘴對孔(注意尖不接觸孔槍頭底部)的側壁上,然后再慢慢敲除細胞吸管定植后,不要搖晃板,它只是可以直接在顯微鏡下被放置,這個(gè)方法可以被說(shuō)成是有效的。

  補充:從6孔板到96孔板,細胞應均勻分布分散。用培養基進(jìn)行稀釋細胞,然后將培養板放置在適當的位置。添加一個(gè)細胞時(shí)和之后,請勿移動(dòng)能力培養板;如果在空氣中沒(méi)有介質(zhì)吹入,但是不要移動(dòng)培養板,加入細胞后,靜置20-30分鐘,然后可以將其移入培養箱。這樣,細胞結構通常具有均勻生長(cháng)。當然,提是細胞消化系統良好。

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