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本生詳解:ELISA試劑盒定性和定量的測定
ELISA試劑盒定性測定:
定性測定的效果判別是對受檢標本中是不是含有待測抗原或抗體作出“有"或“無(wú)"的簡(jiǎn)略答復,分別用“陽(yáng)性"、“陰性"標明?!瓣?yáng)性"標明該標本在該測定體系中有反應?!瓣幮?則為無(wú)反應。用定性判別法也可得到半定量效果,即用滴度來(lái)標明反應的強度,其實(shí)質(zhì)仍是一個(gè)定性試驗。
ELISA試劑盒在這種半定量測定中,將標本作一系列稀釋后進(jìn)行試驗,呈陽(yáng)性反應的zui高稀釋度即為滴度。根據滴度的凹凸,可以判別標本反應性的強弱,這比查詢(xún)不稀釋標本呈色的深淺判別為強陽(yáng)性、弱陽(yáng)性更具定量意義。
ELISA試劑盒定量測定:
ELISA操作過(guò)程凌亂,影響反應要素較多,特別是固相載體的包被難抵達各個(gè)別之間的一起,因此在定量測定中,每批檢驗均須用一系列不相同濃度的參看標準品在相同的條件下制作標準曲線(xiàn)。
ELISA試劑盒測定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA,標準曲線(xiàn)的規模一般較寬,曲線(xiàn)zui高點(diǎn)的吸光度可接近2.0,繪制時(shí)常用半對數紙,以查看物的濃度為橫坐標,以吸光度為縱坐標,將各濃度的值逐點(diǎn)聯(lián)接,所得曲線(xiàn)一般呈S形,其頭、尾部曲線(xiàn)趨于平整,中心較呈直線(xiàn)的有些是的查看區域。
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