對于血清知識點(diǎn)，圍觀(guān)的看過(guò)來(lái)!

　　對于血清知識點(diǎn)，圍觀(guān)的看過(guò)來(lái)!

　　由于血清來(lái)源于動(dòng)物，且含有細胞培養中所需要的各種營(yíng)養(血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長(cháng)因子、激素、無(wú)機物等)，這奠定了血清是細胞培養實(shí)驗中的試劑的基礎。

　　目前血清的采集地主要分布在以下國家：

　　市面上的牛血清產(chǎn)品名稱(chēng)雖然對較多，但根據其不同的特性，大致可以分為以下四種。根據牛的取血年齡可以區分：

　　胎牛血清

　　胎牛血清(Foetal Bovine Serum，簡(jiǎn)稱(chēng)FBS)指的是取自未出生，母牛剖腹心臟穿刺采血得來(lái)的血清。

　　國產(chǎn)胎牛血清

　　國產(chǎn)胎牛血清(并無(wú)明確定義，但通常用此命名)指的是出生4-6小時(shí)，且未進(jìn)行哺乳(unsuckled)進(jìn)食的新生牛，有時(shí)還稱(chēng)作國產(chǎn)新生牛血清。

　　新生牛血清

　　新生牛血清(Newborn Calf Serum，簡(jiǎn)稱(chēng)NBCS，或稱(chēng)小牛血清)指的是出生14天-3個(gè)月進(jìn)行取血的牛血清。

　　成年牛血清

　　成年牛血清(Adult Bovine Serum，簡(jiǎn)稱(chēng)ABS)指的是取血時(shí)牛齡通常超過(guò)12個(gè)月的牛血清。

　　以上取血牛齡的差異主要是受當地國家畜牧業(yè)的發(fā)展及法規限制影響，因為牛血多為畜牧業(yè)副產(chǎn)業(yè)，并未有專(zhuān)門(mén)為取血而養的牛。

　　幾種血清的比較：

　　這幾種不同牛齡血清所含的促細胞生長(cháng)因子、促貼附因子、激素及其他活性物質(zhì)等組分與比例不同。常規來(lái)說(shuō)，年齡越小的牛血清，細胞培養效果越好。

　　胎牛血清培養效果好于新生牛，且因為胎牛未進(jìn)食過(guò)母乳，所以IgG含量低。故目前多數實(shí)驗人員選擇的都是胎牛血清進(jìn)行細胞培養。

　　胎牛血清成分已知的有上千多種，以下為主要成分表：

　　以下是BUNSEN本生技術(shù)小編為您總結的血清相關(guān)的知識點(diǎn)：

　　1、血清的顏色如何?

　　為何有的胎牛血清顏色偏紅，而有的偏黃?是因為胎牛血清顏色是由血紅蛋白(鮮紅)和膽紅素(黃)決定的，主要是受血紅蛋白影響。

　　血紅蛋白含量很低時(shí)，含少量膽紅素，呈淡黃或金黃。血紅蛋白含量高時(shí)，會(huì )呈現淡紅色。

　　需要長(cháng)期保存的血清必須儲存于-20℃冰箱(未開(kāi)封血清有效期為5年)。若存放于4℃，請勿超過(guò)1個(gè)月，若一次無(wú)法用完一瓶，建議將血清無(wú)菌分裝并冷凍。

　　2、血清如何解凍?

　　血清解凍需采用逐步解凍法：將血清從-20℃冰箱放入4℃冰箱中溶解一天，然后移入室溫，待全部溶解后再分裝。在溶解過(guò)程中需不斷

　　輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，減少沉淀生成。切勿直接將血清從-20℃轉入37℃解凍，這樣因溫差較大易造成蛋白質(zhì)凝結并出現沉淀。

　　3、使用前是否需要過(guò)濾?

　　本公司血清在ISO 13485認證的廠(chǎng)房中生產(chǎn)，經(jīng)過(guò)3次0.1 μm過(guò)濾，出廠(chǎng)經(jīng)過(guò)檢測并且會(huì )使用三種以上的細胞株進(jìn)行培養測試及無(wú)菌檢測，污染幾率非常非常非常低(重要的事情說(shuō)三遍)。通常細胞污染有非常多的可能性，根據協(xié)助使用者進(jìn)行分析檢測，結果表明絕大部分都是因人為操作失誤導致污染。因此買(mǎi)來(lái)的血清不需要再次進(jìn)行過(guò)濾。

　　4、為什么血清中會(huì )有沉淀生成，主要成分是什么，會(huì )對實(shí)驗有什么影響?

　　血清中沉淀主要有：纖維蛋白(絮狀沉淀)，胎球蛋白，脂蛋白，冷凝集素，玻連蛋白，磷酸鈣(顯微鏡下小黑點(diǎn)沉淀)，膽固醇等。

　　原因：造成沉淀的主要原因是溫度的改變。熱滅活，反復凍融，長(cháng)期儲存于2-8℃或者室溫。

　　預防：非必要，不用熱滅活;避免反復凍融;-20℃保存;4℃全融(期間間斷搖晃均勻);2000 rpm離心5分鐘(不建議用0.2 μm濾膜過(guò)濾)，取上清使用。

　　5、黑膠蟲(chóng)是來(lái)源于血清嗎?

　　目前科學(xué)界對黑膠蟲(chóng)的身份并無(wú)定論, 通常是顯微鏡下觀(guān)察到密密麻麻的小黑點(diǎn)在培養基中自主游動(dòng)，就稱(chēng)為黑膠蟲(chóng)污染。

　　黑膠蟲(chóng)在鏡下的典型特征呈卵圓狀、球狀、桿狀等，可引起細胞生長(cháng)遲緩或裂解凋亡。

　　目前沒(méi)有充分的數據表明黑膠蟲(chóng)來(lái)源于血清，因為其尺寸遠大于血清過(guò)濾時(shí)所用的0.1微米(μm)濾膜。建議各位老師通過(guò)使用三抗(Cat#: C3422-0100)外加支原體處理試劑(Cat#: 03-038-1B)嘗試殺滅黑膠蟲(chóng)。

　　6、血清存在批間差嗎?

　　答案是毋庸置疑的，因為血清來(lái)源于動(dòng)物，其組成成分有1000種左右，且血清組成及含量常隨供血動(dòng)物的性別、年齡、生理條件和營(yíng)養

　　條件不同而異。每個(gè)批號的組分和百分比含量都是不固定的，所以批間差異是存在的。

　　建議先進(jìn)行批號測試，篩選出合適批號，購買(mǎi)半年甚至一年以上的用量，避免批間差造成實(shí)驗波動(dòng)(胎牛血清在-20℃保存可達5年)。

　　Tips：

　　1、如果要除去血清中的沉淀，可以將血清分裝至無(wú)菌離心管中，400g 離心，留上清即可。由于濾膜容易被沉淀堵塞，因此不建議用過(guò)濾的方法。

　　2、沉淀不是檢驗血清的硬指標，但為了實(shí)驗準確、實(shí)驗美觀(guān)、實(shí)驗便利，還是應該盡量減少沉淀的產(chǎn)生。掌握正確的血清解凍、使用方法，再加上一款品質(zhì)穩定的優(yōu)秀血清，對于細胞實(shí)驗來(lái)說(shuō)，至關(guān)重要。

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