對于ELISA試劑盒變質(zhì)的原因您知道多少?

　　對于ELISA試劑盒變質(zhì)的原因您知道多少?

　　在ELISA實(shí)驗中我們經(jīng)常會(huì )碰到試劑盒變質(zhì)的問(wèn)題，是什么原因導致了ELISA試劑盒的變質(zhì)呢?接下來(lái)BUNSEN本生就和大家說(shuō)一說(shuō)導致ELISA試劑盒變質(zhì)的原因有哪些。

　　導致ELISA試劑盒變質(zhì)的原因主要分為七種：

　　1、方法學(xué)的影響

　　ELISA測定模式包括以下幾種：雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法、競爭抑制法，其中競爭抑制法(HBeAb,HBcAb等采用)因受操作時(shí)差所引起的平競爭等因素的影響，結果重復性較差，質(zhì)量較難控制。

　　2、試劑因素

　　不同批次的ELISA試劑在制作過(guò)程中很難bao證質(zhì)量一致，即使是通過(guò)批檢的項目其檢測結果也會(huì )存在差異，因此必須選擇和訂購長(cháng)批號的試劑，并bao證保存條件。 嚴格執行這一標準可以避免因試劑批號改變而重新建立質(zhì)控體系及重新評估試劑的復雜過(guò)程，并且能夠bao證結果的穩定性;對于效期短、使用率低的試劑，應當小量分裝，每次使用則取分裝部分即可，避免反復凍融造成試劑的失效。

　　3、樣本因素

　　標本干擾因素包括內源性干擾因素和外源性干擾因素，者包括類(lèi)風(fēng)濕因子、補體、異嗜性抗體、自身抗體、溶菌酶等，后者包括標本溶血、標本被細菌污染、標本貯存時(shí)間過(guò)長(cháng)、標本凝固不全、冷凍標本的反復凍融等。

　　4、操作因素

　　ELISA操作步驟復雜，操作不當將引起較大的誤差。加樣、溫育、洗滌、顯色、比色。

　　5、灰區的設置

　　通常情況下，ELISA定性實(shí)驗以“陽(yáng)性”和“陰性”來(lái)報告結果，兩者間有一條分界線(xiàn)被稱(chēng)為“陽(yáng)性判斷值”(cut-off value，CO值)，這是定性免疫測定結果報告的依據。

　　6、標本復查

　　ELISA手工檢測過(guò)程復雜，影響因素較多，即使室內質(zhì)控在控，也可能因孔間差異而造成結果的差異，因此加大復查力度是bao證結果準確性的可靠方法。

　　7、表示結果的常用方法

　?、?定性測定。

　?、?半定量測定，結果一般以滴度表示。

　?、?定量測定，即用已知量的標準品作一系列稀釋后進(jìn)行ELISA測定，繪制標準曲線(xiàn)，結果以量或單位表示。在ELISA定量檢測中每一塊反應板都必須繪制相應的標準曲線(xiàn)。

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