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知識講解:培養基保存條件及相關(guān)滅菌的有關(guān)問(wèn)題
培養基的保存條件:
1.建議按照產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的要求放置在推薦的儲存條件。
2.干粉培養基:即使能一定程度上抵御光和濕度,但是建議客戶(hù)還是存放在干燥避光的環(huán)境。干粉的最佳儲存溫度是15-25 °C (59-77 °F)。長(cháng)時(shí)間存放導致的pH值變化可能通過(guò)酸堿調節。干粉培養基是容易吸濕的,所以瓶蓋應該盡量保持蓋緊。吸水后的干粉可能導致pH變化并且結塊。明顯結塊且不易用藥匙壓碎的干粉培養基不建議繼續使用,因為內部化學(xué)成分可能發(fā)生變化。
3. 對于配好的培養基,溫度是4-12°C且避光保存。裝在密閉容器或密封袋中避免污染和水分流失。含有血、蛋黃等高營(yíng)養成分的培養基應該放在2-8°C 存放。放入密閉容器前的平板需要保持干燥并且溫度不能太高。否則在密閉容器中產(chǎn)生太多凝結水會(huì )導致污染。失水超過(guò)15%的瓊脂可能影響微生物生長(cháng),尤其可能影響革蘭氏陰性菌。液體培養基過(guò)度失水也會(huì )導致某些成分的沉淀和結晶。
培養基滅菌問(wèn)題:
1.培養基的配制是否都需要高壓滅菌,多長(cháng)時(shí)間比較合適?
培養基配制方法,建議首先參考產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)指示的配制、滅菌操作的指示,進(jìn)行操作。
含有瓊脂的干粉培養基需要加熱煮沸,因為瓊脂的溶點(diǎn)在96°C左右。需要保證各成分充分混勻。熱水溶解無(wú)法代替加熱煮沸。培養基未煮沸狀態(tài)為渾濁,隨著(zhù)加熱煮沸,顆粒溶解,培養基會(huì )變澄清,且不含有塊狀。一般培養基沸騰后,觀(guān)察到澄清,且沒(méi)有明顯的不溶塊狀或膠狀物即可。
有些培養基含有溫度敏感的成分,不能高壓滅菌,因此在操作上需要格外注意,需要參考說(shuō)明書(shū)的具體操作。
2.已經(jīng)輻照滅菌的培養基還能高溫高壓再滅菌嗎?
已經(jīng)輻照滅菌的培養基,通常不建議再高溫高壓滅菌或其他加熱手段。如果無(wú)菌模擬灌裝實(shí)驗需要模擬過(guò)濾滅菌以及高溫高壓蒸汽滅菌的兩個(gè)過(guò)程,通常滅菌后的培養基仍然能夠提供足夠營(yíng)養以保證微生物生長(cháng),但是強烈建議使用者在模擬過(guò)程中加測微生物促生長(cháng)實(shí)驗。
3.干粉或顆粒培養基使用說(shuō)明書(shū)中121℃滅菌15分鐘是指滅菌的過(guò)程時(shí)長(cháng)嗎?
培養基說(shuō)明書(shū)中121℃滅菌15分鐘是指高壓蒸汽滅菌法,在溫度達到121℃,持續滅菌15min。建議首先確認滅菌設備的原理為高壓蒸汽滅菌法,而且滅菌過(guò)程是符合相關(guān)滅菌效果驗證的,以確保培養基得到有效滅菌。
備注:以上信息僅供參考,具體信息說(shuō)明及操作以廠(chǎng)家說(shuō)明書(shū)為準。
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