馬ELISA試劑盒檢測過(guò)程中出現的問(wèn)題及解決辦法
1. 加入反應終止液后,沒(méi)有吸光值或吸光值偏低。
a.原因:未加入酶標記物。
解決辦法:請按照操作步驟進(jìn)行。
b.原因:試劑盒內容物未能充分回。
解決辦法:確定試劑盒內容物回溫后再進(jìn)行操作。
c.原因:室溫太低。解決辦法:若室溫太低(<19℃),請于操作步驟4,適當延長(cháng)溫育時(shí)間。
d.原因:未使用試劑盒的清洗液清洗。
解決辦法: 請用試劑盒內所提供的清洗液清洗。
e.原因:試劑盒已過(guò)有效期限。
解決辦法:請更換成仍在有效期限內的試劑盒。
2. 標準曲線(xiàn)線(xiàn)性不佳,或是平行性不好。
a.原因:溫育位置避光不好或受到氣流干擾。
解決辦法: 請確認溫育位置既不透光也不透風(fēng)(如抽屜內)。
b.原因:操作時(shí)間拖太久。
解決辦法:請在方法熟練后再進(jìn)行操作。
c.原因:微孔間相互污染。
解決辦法: 加樣品時(shí),請小心勿濺出微孔外,以免造成其它微孔的污染。
d.原因:標準品或酶標記物所加入的量不一致。
解決辦法:請使用已校正過(guò)的移液槍?zhuān)⒋_保其與吸頭之間有高度密合性。
e.原因:添加樣品或試劑的操作方法不正確。
解決辦法:加樣品或試劑時(shí),吸頭請勿接觸微孔。
f.原因:洗板過(guò)程發(fā)生問(wèn)題(如管路堵塞、洗完板后未立刻進(jìn)行下一步驟)。
解決辦法:請隨時(shí)監控洗板機洗板過(guò)程,洗完后立即進(jìn)行下一步驟。
3. 吸光值均偏高(或線(xiàn)性不夠陡)。
a.原因:室溫太高(>25℃)。
解決辦法: 若無(wú)法降低室內溫度,請適當縮短步驟4的溫育時(shí)間。
b.原因:底物溶液受到污染。
解決辦法: 若發(fā)現底物溶液已呈現淡藍色,請不要再使用。
c.原因:反應時(shí)間超過(guò)太久。
解決辦法:請控制反應時(shí)間。
d.原因:酶標記物污染了盒內其它試劑。
解決辦法:使用過(guò)的吸頭應立即丟棄,可避免試劑間相互污染,凡是試劑(特別是酶標記物與底物溶液)接觸過(guò)的容器應立即清洗干凈。(先以漂白水浸泡,再以清水沖洗干凈,可確保無(wú)殘留)
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