關(guān)于超濾管的常見問題與解答

　　關(guān)于超濾管的常見問題與解答

Q:超濾管的膜材質(zhì)是什么?

A:超濾管的膜材質(zhì)為密理博的Ultracel再生纖維素膜，生產(chǎn)工藝嚴(yán)格,截留分子量明確而準(zhǔn)， 蛋白吸附損失小。

Q:如果要用超濾的方法分離兩種蛋白，那么這兩個蛋白的大小需要相差多少?

A:按照經(jīng)驗,建議兩個蛋白的分子量要相差 一個數(shù)量級(10倍)。

Q:超濾管可以用酒精消毒滅菌么?

A: 超濾管與70%乙醇是兼容的，但是對滅菌處理的具體方法沒有做相關(guān)的測試，所以無法提供更進(jìn)一步的參考信息。

Q:超濾裝置是否可以用于高壓滅菌?

A: 超濾管都是采用熱封設(shè)計,不可以用高壓高溫滅菌。

Q:蛋白在濃縮時出現(xiàn)了沉淀,如何改進(jìn)?

A:蛋白如果濃縮過快或者過度濃縮都有可能引起蛋白沉淀。建議蛋白濃縮后的 濃度不超過20mg/ml.對于對濃縮速度敏感而容易沉淀的蛋白，建議的改進(jìn)方法是:

1)離心力降為推薦離心力的30%-50%

2)改用截留分子量大的超濾管(如原本選用10k,此時可以選擇30k)

3)在濃縮過程中取出超濾管, 用吸頭反復(fù)吹吸幾次后再繼續(xù)濃縮

Q:濃縮后發(fā)現(xiàn)濃縮液中沒有目的蛋白,可能的原因有哪些?

A:首先,超濾管的蛋白起始濃度為25ug/ml.請確保樣本的起始濃度大于這個濃度。其次,如果問題仍然出現(xiàn)，請不要丟棄樣本濾過液以便用于分析可能的原因:

1)如果目的樣本在濾過液中，那么請排查: .

a)是否選擇了合適截留分子量的超濾管(目的蛋白分子量的1/2或者1/3)?

b)使用的離心力是否是在限定范圍內(nèi)?如果使用的是rpm,請換算成相應(yīng)的g離心力,具體換算方

法請垂詢。

c) 離心機(jī)最近是否有校準(zhǔn)過?

Q:有時候用超濾離心管連水都離不下來,可能是什么原因?

A:超濾膜中含有微量甘油。如果出現(xiàn)這種情況,請先用0.1 N NaOH清洗再離心。最后用緩沖液或Milli-Q@水再次清洗后甩干。清洗后的濾膜應(yīng)立即使用，如暫時不用,請保持潤濕狀態(tài),避免重新干燥。

注意事項

為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

本試劑僅供實驗室研究使用

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