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如何選擇細胞培養板?
細胞培養板依底部形狀的不同可分為平底和圓底(U型和V型);培養孔的孔數有6、12、24、48、96、384、1536 孔等;根據材質(zhì)的不同有Terasaki板和普通細胞培養板。具體選擇時(shí)根據培養細胞的類(lèi)型、所需培養體積及不同的實(shí)驗目的而定。
(一)平底和圓底(U型和V型)培養板的區別和選擇:
貼壁細胞一般用平底培養板。懸浮型細胞的培養一般用V型。
U型培養板亦多用于培養懸浮型細胞 。V型培養板有時(shí)用做免疫學(xué)血凝集的實(shí)驗。
不同型狀的板子自然有不同用途。平底的什麼類(lèi)型的細胞都可用﹐但當細胞數目較少﹐如做克隆時(shí)﹐就用BUNSEN本生96孔平底板﹐另外﹐做MTT等實(shí)驗時(shí)﹐無(wú)論貼壁和懸浮細胞﹐一般均用平底板。至於U或V型板﹐一般在某些特殊要求時(shí)才使用。如在免疫學(xué)方面﹐當做兩種不同淋巴細胞混合培養時(shí)﹐需要二者相互接觸以刺激﹐因此﹐一般需要U型板﹐因細胞會(huì )由於重力的作用而聚集在一個(gè)很小的範圍內。V型板的用途更少﹐一般用于細胞殺傷實(shí)驗時(shí)﹐為了使效靶細胞緊密接觸﹐常使用V型板﹐但這種試驗也可用U型板替代(加入細胞後﹐低速離心)如果是養細胞的話(huà), 通常是選用平底的, 另外要特別注意材質(zhì), 標示"Tissue Culture (TC) Treated"就是養細胞用的。
圓底的好像沒(méi)聽(tīng)說(shuō)過(guò)拿來(lái)養細胞。 圓底的通常是拿來(lái)做分析, 化學(xué)反應, 或是保存樣品用的, 因為圓底比較好將液體吸得乾淨, 如果用平底的就不好吸了。 不過(guò), 如果你是要測吸光值的話(huà), 一定要買(mǎi)平底的才行。
大部分細胞培養都用平底培養板,便于鏡下觀(guān)測、有明確的底面積、細胞培養液面高度相對一致,還便于MTT檢測。
圓底培養板主要用于同位素摻入的實(shí)驗,需要用細胞收集儀收集細胞的培養,如“混合淋巴細胞培養"等?! ^別:酶標板一般要比細胞培養板貴,細胞板主要做細胞培養,但也可以用來(lái)測蛋白濃度;酶標板包括包被板和反應板,一般不能用做細胞培養,它主要做免疫酶聯(lián)反應后的蛋白檢測,它需要更高的要求還需要特定的酶標工作液。如下是個(gè)用酶標板檢測冠狀病毒IgM/IgG抗體例子:見(jiàn)網(wǎng)站
常用不同培養板的孔底面積及推薦加液量:不同孔板所加培養液的液面都不宜太深,一般在2-3mm范圍,結合不同孔的底面積就可算出各培養孔的適宜加液量。若加液量過(guò)多會(huì )影響氣體(氧氣)交換,而且在搬動(dòng)過(guò)程中易溢出造成污染。具體所加細胞密度依實(shí)驗的目的不同靈活掌握。
培養器皿 面積(cm2)培養液量(ml) 細胞量
96 孔培養板 0.32 0.1 10e5
24孔培養板 2 1.0 5×10e5
12孔培養板 4.5 2.0 10e6
6孔培養板 9.6 2.5 2.5×10e6
3.5 cm 培養皿 8 3.0 2×10e6
6 cm 培養皿 21 5.0 5.2×10e6
10 cm 培養皿 55 10.0 13.7×10e6
25cm2 培養瓶 25 5.0 5×10e6
75cm2 培養瓶 75 15~30 2×10e7
(一)細胞培養板的密閉和污染問(wèn)題:
細胞培養板的加樣和操作:細胞培養板在進(jìn)行細胞操作時(shí)同樣遵循嚴格無(wú)菌的原則,各項操作要規范、科學(xué),不對細胞的生長(cháng)造成額外的影響。這其中常見(jiàn)的問(wèn)題就是如何加樣后細胞的均勻和盡量減少換液對細胞生長(cháng)狀態(tài)的影響。
如何選擇細胞培養板?本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承:遵紀守法,嚴于律己,寬仁以待,敢于承擔的企業(yè)精神作為標準,以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護和拓展市場(chǎng),較大限度的滿(mǎn)足客戶(hù)的需求。與客戶(hù)的共贏(yíng),是我們的發(fā)展目標。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作,共創(chuàng )美好的未來(lái)。
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