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本生簡(jiǎn)述,如何選擇PCR實(shí)驗的所需耗材?
一般想到的可能是獲取的DNA/RNA質(zhì)量、反轉錄的效率、引物的特異性乃至DNA聚合酶的保真度、擴增長(cháng)度等問(wèn)題,但很少有人會(huì )想到耗材的選擇,可能也會(huì )影響您的實(shí)驗結果。那么關(guān)于PCR實(shí)驗耗材我們改如何選擇呢?下面BUNSEN本生小編詳解不放來(lái)看下:
需要明確的是我們做的是哪種PCR實(shí)驗。根據檢測方法的不同,PCR實(shí)驗分為普通PCR法和熒光定量PCR法,者一般是終點(diǎn)PCR跑膠法測定,所以在選擇耗材時(shí)需要關(guān)注的主要是耗材本身的導熱性和密封性;而后者是實(shí)時(shí)檢測熒光信號,除了導熱性和密封性外,對透光性和避光性也有所要求。換句話(huà)而言,可以做熒光定量PCR的耗材一定可以來(lái)做普通PCR,反之,效果卻會(huì )差很多!
確定好了實(shí)驗類(lèi)型,我們就可以選擇耗材了,如面所述,我們知道了密封性、導熱性、透光性、避光性等因素是我們需要關(guān)注的,那為什么要關(guān)注這些呢?
一、密封性
密封性越好,產(chǎn)物的揮發(fā)越少,得到的產(chǎn)物就越多同時(shí)氣溶膠的產(chǎn)生也越少,對于下一輪實(shí)驗的污染也就越少,也就意味著(zhù)假陽(yáng)性的產(chǎn)生率越低。
二、導熱性
導熱性越好越均一,PCR的速度就越快,準確度也越高。
三、透光性
這主要是對于熒光定量而言,我們知道它是一種實(shí)時(shí)定量的方式,那么耗材本身的透光性就直接關(guān)系到我們檢測到的熒光信號多少,如果選擇耗材透光性不足,本該檢測到的信號檢測不到,那就會(huì )造成我們對結果的誤判。
四、避光性
這也是針對熒光定量而言的,同上面的因素,如果我們在整個(gè)實(shí)驗過(guò)程中沒(méi)注意避光,帶有熒光的試劑過(guò)度被消耗,那*直接就會(huì )影響我們實(shí)驗的擴增效率,導致不準確的結果產(chǎn)生。
PCR單管
采用的一次注塑成型技術(shù),超薄設計,熱傳導快,視窗比平面低,不易被劃擦,管子密封性更好,近乎零蒸發(fā),減少了氣溶膠的污染,*大程度避免了假陽(yáng)性的產(chǎn)生。熒光系列,蓋子高度透光,可適用于頂讀與低讀。
八聯(lián)管(適用普通PCR)
低于平面的高透視窗設計,可以*大程度避免被劃擦。進(jìn)口的原材料的使用使得管壁具有均一的平整和穩定的不黏壁性,確保了樣品處理和吸取時(shí)的精準度。
PCR板
不同于市面上其他廠(chǎng)家底部注塑的方式,BUNSEN本生注塑點(diǎn)是在板面上的孔與孔的交叉處,這樣使得PCR板的管底與PCR儀的接觸更好,同時(shí)采用純度高達99.9%的聚丙烯,超薄設計、壁厚一致均勻的工藝使得熱傳導精確、控溫準確、有效減少了實(shí)驗循環(huán)時(shí)間。
本生簡(jiǎn)述,如何選擇PCR實(shí)驗的所需耗材?既能滿(mǎn)足研發(fā)類(lèi)客戶(hù)對產(chǎn)品種類(lèi)、包裝的特殊要求,也能滿(mǎn)足生產(chǎn)型企業(yè)從小試、中試到規?;a(chǎn)各個(gè)階段的綜合需求。產(chǎn)品涵蓋有熒光定量PCR耗材(八聯(lián)管,單管,96孔板,384孔板,封板膜,輔助器等),ELISA試劑盒,移液器吸嘴,離心管,凍存管,培養皿,培養板,培養瓶,吸頭,儀器及手套,培養基,抗體,血清,色譜耗材,針頭過(guò)濾器及實(shí)驗室常用耗材。
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