操作ELISA試劑盒的實(shí)驗步驟及常見(jiàn)問(wèn)題匯總

　　操作ELISA試劑盒的實(shí)驗步驟及常見(jiàn)問(wèn)題匯總

　　ELISA試劑盒實(shí)驗操作步驟的詳細說(shuō)明：

　　1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開(kāi)封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。

　　2.濃洗滌液可能會(huì )有結晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結果。

　　3.各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。

　　4.請每次測定的同時(shí)做標準曲線(xiàn)，做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標準品孔孔的OD值)，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定，計算時(shí)請*后乘以總稀釋倍數(×n×5)。

　　5.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

　　6.底物請避光保存。

　　7.嚴格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

　　ELISA試劑盒實(shí)驗操作的常見(jiàn)問(wèn)題。

　　一、一次ELISA實(shí)驗需要多長(cháng)時(shí)間?

　　雙抗體夾心ELISA法一次實(shí)驗需要3.5-4小時(shí)，競爭ELISA法一次實(shí)驗需要2-2.5小時(shí)。

　　二、血清樣本如何處理?

　　全血標本于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜后于1000×g離心20分鐘。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應再次離心。

　　三、血漿樣本如何處理?

　　建議選擇EDTA或者檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，于1000×g離心15分鐘，仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應再次離心。

　　四、細胞上清液樣本如何處理?

　　檢測分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(1000×g)。仔細收集上清。

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