牛生長(cháng)激素（GH）ELISA試劑盒技術(shù)文獻

牛生長(cháng)激素(GH)ELISA試劑盒，操作方法及步驟，對于牛生長(cháng)激素(GH)ELISA試劑盒的操作步驟及其他注意事項，我司業(yè)務(wù)員整理如下：

使用目的

本試劑盒用于測定牛血清、血漿樣本中生長(cháng)激素(GH)含量。

實(shí)驗原理

本 試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中牛生長(cháng)激素(GH)水平。用純化的牛生長(cháng)激素(GH)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入生長(cháng)激 素(GH)，再與HRP標記的生長(cháng)激素(GH)抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB 顯色。TMB 在HRP 酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的生長(cháng)激素(GH)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長(cháng)下測定吸光度(OD值)，通過(guò)標準曲線(xiàn)計算樣品中牛生長(cháng)激素(GH)濃度。

牛生長(cháng)激素(GH)ELISA試劑盒 操作步驟

1. 標準品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑藴势分?，用?hù)可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。

2. 加樣：分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加 樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5 倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。

4. 配液：將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋后備用

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置30 后棄去，如此重復5 次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15 分鐘.

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(此時(shí)藍色立轉黃色)。

11. 測定：以空白空調零，450nm 波長(cháng)依序測量各孔的吸光度(OD 值)。測定應在加終止液后15 分鐘以?xún)冗M(jìn)行。

牛生長(cháng)激素（GH）ELISA試劑盒技術(shù)文獻

注意事項

1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用，酶標包被板開(kāi)封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。

2.濃洗滌液可能會(huì )有結晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結果。

3.各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。次加樣時(shí)間控制在5 分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。

4. 請每次測定的同時(shí)做標準曲線(xiàn)，做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD 值大于標準品孔孔的OD 值)，請先用樣品稀釋液稀釋定倍數(n 倍)后再測定，計算時(shí)請后乘以總稀釋倍數(×n×5)。

5. 封板膜只限次性使用，以避免交叉污染。

6.底物請避光保存。

7.嚴格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

8.所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9.本試劑不同批號組分不得混用。

10. 如與英文說(shuō)明書(shū)有異，以英文說(shuō)明書(shū)為準。